电子显微镜的组成部分 电子显微镜样本的预处理方法

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摘要:电子显微镜,简称电镜,经过五十多年的发展已成为现代科学技术中不可缺少的重要工具。电子显微镜由镜筒、真空装置和电源柜三部分组成。我们知道电子显微镜对样本的要求比较高,因此在观察生物样本的时候必须进行预处理。一般的处理过程包括:固定、冷固定、脱干、垫入、分割、染色等。接下来就一起来了解下电子显微镜的知识吧。

一、电子显微镜的组成

电子显微镜由镜筒、真空装置和电源柜三部分组成。

1、镜筒

主要有电子源、电子透镜、样品架、荧光屏和探测器等部件,这些部件通常是自上而下地装配成一个柱体。

电子透镜用来聚焦电子,是电子显微镜镜筒中最重要的部件。一般使用的是磁透镜,有时也有使用静电透镜的。它用一个对称于镜筒轴线的空间电场或磁场使电子轨迹向轴线弯曲形成聚焦,其作用与光学显微镜中的光学透镜(凸透镜)使光束聚焦的作用是一样的,所以称为电子透镜。光学透镜的焦点是固定的,而电子透镜的焦点可以被调节,因此电子显微镜不像光学显微镜那样有可以移动的透镜系统。现代电子显微镜大多采用电磁透镜,由很稳定的直流励磁电流通过带极靴的线圈产生的强磁场使电子聚焦。电子源是一个释放自由电子的阴极,栅极,一个环状加速电子的阳极构成的。阴极和阳极之间的电压差必须非常高,一般在数千伏到3百万伏特之间。它能发射并形成速度均匀的电子束,所以加速电压的稳定度要求不低于万分之一。

样品可以稳定地放在样品架上,此外往往还有可以用来改变样品(如移动、转动、加热、降温、拉长等)的装置。

探测器用来收集电子的信号或次级信号。

2、真空装置

用以保障显微镜内的真空状态,这样电子在其路径上不会被吸收或偏向,由机械真空泵、扩散泵和真空阀门等构成,并通过抽气管道与镜筒相联接。

3、电源柜

由高压发生器、励磁电流稳流器和各种调节控制单元组成。

二、电子显微镜如何进行样本处理

1、固定:为了尽量保存样本的原样使用戊二醛来硬化样本和使用锇酸来染色脂肪。

2、冷固定:将样本放在液态的乙烷中速冻,这样水不会结晶,而形成非晶体的冰。这样保存的样品损坏比较小,但图像的对比度非常低。

3、脱干:使用乙醇和丙酮来取代水。

4、垫入:样本被垫入后可以分割。

5、分割:将样本使用金刚石刃切成薄片。

6、染色:重的原子如铅或铀比轻的原子散射电子的能力高,因此可被用来提高对比度。

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