一、分光光度计的组成部分
分光光度计的型号繁多,但其基本结构由以下几部分组成:光源、单色器、吸收池、检测系统及信号显示系统。
1、光源
在吸光度的测量中,要求光源发出的所需波长范围内的连续光谱具有足够的光强度,并能在一定时间内保持稳定。
2、单色器
单色器是能将光源发射的连续光源分解为单色光并从中选出任一波长单色光的光学系统。它由入射狭缝、准光器、色散原件、聚焦元件和出射狭缝等几个部分组成。
3、吸收池
吸收池又称比色皿,用于盛装参比溶液和待测试液。仪器一般配有液层厚度为0.5cm、1cm、2cm、3cm等的长方形比色皿。
4、检测系统
检测系统通常通过利用光电效应将透过吸收池的光信号转变为可测的电信号,而且所产生的电信号应与照射于检测器上的光信号成正比。可见分光光度计常常使用光电管或光电倍增管做检测器。
5、信号显示系统
光电转换器产生的各种电信号,经放大等处理后,用一定方式显示出来,以便于计算和记录。
二、分光光度计原理
分光光度计的原理是采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光线透过测试的样品后,部分光线被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度,样品的吸光值与样品的浓度成正比。
三、分光光度计的种类
1、可见分光光度计
用来测量待测物质对可见光的吸光度并进行定量分析的仪器,称为可见分光光度计。
2、紫外可见分光光度计
紫外可见光谱仪用来测量待测物质对可见光或紫外光(200-760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器,可以测定核酸和蛋白的浓度,也可以测定细菌细胞密度。
3、红外分光光度计
一般的红外光谱是指大于760nm的红外光谱,这是研究有机化合物最常用的光谱区域,能分析各种状态(气、液、固)的试样。
4、荧光分光光度计
荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器,应用于科研、化工、医药、生化、环保以及临床检验、食品检验、教学实验等领域,通过对这些参数的测定,不但可以做一般的定量分析,而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化,从而阐明分子结构与功能之间的关系。