一、荧光酶标仪和普通酶标仪的区别在哪里
荧光酶标仪和普通酶标仪两者最大的区别就是原理的不同。
1、 荧光酶标仪
由光源氙弧灯发出的光通过切光器使其变成断续之光以及激发光单色器变成单色光后,此光即为荧光物质的激发光,被测的荧光物质在激发光照射下所发出的荧光,经过单色器变成单色荧光后照射于测样品用的光电倍增管上,由其所发生的光电流经过放大器放大输至记录仪,激发光单色器和荧光单色器的光栅均由电动机带动的凸轮所控制,当测绘荧光发射光谱时,将激发光单色器的光栅,固定在最适当的激发光波长处,而让荧光单色器凸轮转动,将各波长的荧光强度讯号输出至记录仪上,所记录的光谱即发射光谱。
当测绘荧光激发光谱时,将荧光单色器的光栅固定在最适当的荧光波长处,只让激发光单色口的凸轮转动,将各波长的激发光的强度讯号输出至记录仪,所记录的光谱即激发。
当进行样品溶液的定量分析时,将激发光单色器固定在所选择的激发光波长处,将荧光单色器调节至所选择的荧光波长处,由记录仪得出的信号是样品溶液的荧光强度。
2、普通酶标仪(以光吸收酶标仪为例)
光是电磁波,波长100nm~400nm称为紫外光,400nm~780nm之间的光可被人眼观察到,大于780nm称为红外光。光吸收酶标仪测定的原理是在特定波长下,检测被测物吸光值。
光通过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。
检测单位用OD值表示,OD是opticaldelnsity(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度,OD=1og(1/trans),其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer法则,OD值与光强度成下述关系:E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度,Ι0为在检测物之前的光强度,Ι为从被检测物出来的光强度。
二、荧光酶标仪和 普通酶标仪哪个更好
前文已经简单了解到了荧光酶标仪和普通酶标仪的区别在哪里,那么在选择的时候,荧光酶标仪和普通酶标仪哪个更好呢?
1、普通酶标仪(以光吸收酶标仪为例)
优点:检测检测技术成熟,成本低,操作简单。
缺点:动态范围窄,灵敏度比较低,特异性不强。
2、荧光酶标仪
优点:灵敏度高,可实时检测,使用方便,检测模式多样。
缺点:易受外界干扰,激发光与发射光容易互相影响。
因此,两者比较起来,各有自己的优缺点,根据自己的实际情况进行选择即可。